ELISPOT - nowe badanie na BORELIOZĘ!

Odpowiedz immunologiczna może przebiegać odmiennie od typowego schematu opisywanego w przypadku innych chorób infekcyjnych, dlatego wykonywane rutynowo w laboratoriach testy serologiczne w kierunku boreliozy często sprawiają trudności interpretacyjne. Złożona budowa krętków ich zmienność antygenowa wpływa na konieczność konstruowania i standaryzacji odpowiednio czułych i swoistych testów laboratoryjnych, które wciąż ulegają technologicznym modyfikacjom. Wykorzystując gatunkowo swoiste antygeny istnieją wciąż ograniczone możliwości w określeniu specyfiki zakażenia. Diagnostyka z wyboru prowadzona w oparciu o testy nie eliminuje całkowicie reakcji krzyżowej. Nie można jednoznacznie wykluczyć zjawiska homologii antygenów różnych genogatunków jak również nie można rozstrzygnąć problemu jedno/wielogenogatunkowej etiologii boreliozy z Lyme. Problemy jakie napotykamy w diagnostyce laboratoryjnej boreliozy, są wynikiem strategii życiowych Borrelia burgdorferi, skomplikowanej odpowiedzi immunologicznej i niedoskonałości metod diagnostycznych. Od kliku miesięcy do szeregu badań laboratoryjnych dołączył test ELISpot. "ELISPOT (Enzyme-Linked ImmunoSpot Assay, synonimy: Immunospot, ELISA Spot, ELISA-plaque) staje się coraz bardziej uznanym narzędziem w nowoczesnej medycynie. Technika ma już ugruntowaną pozycję w takich dziedzinach jak biotechnologia (produkcja i selekcja przeciwciał), wakcynologia (produkcja i testowanie szczepionek), immunologia (badania naukowe i diagnostyka), choroby zakaźne (testy diagnostyczne o podwyższonej czułości), czy wreszcie onkologia (rozwój immunoterapii i testy leków przeciwnowotworowych). Coraz częściej ELISPOT stosowany jest również w alergologii doświadczalnej i klinicznej. ELISPOT, podobnie jak ELISA, opiera się na stosowaniu par przeciwciał wiążących oraz detekcyjnych. Są jednak istotne różnice, np. wiązanie przeciwciał z fazą stałą odbywa się w trakcie hodowli komórkowej. Dzięki temu ELISPOT przezwycięża szereg problemów metodycznych techniki ELISA oraz zapewnia wysoką czułość. Wśród 1 000 000 komórek można wykryć pojedynczą komórkę wydzielającą dane białko (cytokinę, białko efektorowe, receptor, marker powierzchniowy lub przeciwciało). ELISPOT nie jest wrażliwy na zachodzącą w hodowli konsumpcję badanej cytokiny (jest to istotne np. przy oznaczaniu IL-4 lub IL-2). Dual ELISPOT jest rozwinięciem techniki, umożliwiającym śledzenie wydzielania różnych białek przez tę samą komórkę. Dzięki połączeniu metod ELISPOT i ELISA można ponadto szacować średnią produkcję cytokin przez pobudzone komórki."

Borrelia ELISPOT może wyeliminować pewne problemy:

• Badanie odzwierciedla aktualną aktywność Borrelia burgdorferi i przewlekłych zakażeń.

• ELISpot jest bardzo czuły i może wykryć nawet Borrelia burgdorferi-reaktywne komórki T. Z poziomu detekcji, które mogą być tak niskie, jak w jednej komórce, ELISpot jest jednym z najbardziej czułych testów komórkowych.

• Elispot jest między 20 i 200 razy bardziej wrażliwy w porównaniu z konwencjonalną ELISA.

• Elispot wykazuje podobną czułość jak RT-PCR (PCR) w czasie rzeczywistym analizy, ale rozpoznaje wydzielane białka zamiast RNA (mRNA).

• ELISPOT może być pomocny przy monitorowaniu terapii. Pozytywne reakcje w ELISPOT wykazania bieżącej aktywnej infekcji przez:

• Borrelia burgdorferi

• Borrelia miyamotoi

• Anaplasma / Ehrlichia

• Chlamydia pneumoniae

• Chlamydia trachomatis

• Yersinia

• Wirus Epsteina-Barr (EBV )

• Wirus opryszczki pospolitej (HSV 1/2) Antygeny Borrelia ELISPOT:

• Borrelia burgdorferi Całkowity Antygen: szczep Borrelia burgdorferi B31-odniesienia (Borrelia burgdorferi sensu stricto)

• Borrelia burgorferi Peptide-Mix: OspA z Borrelia b. sensu stricto, Borrelia afzelii, Borrelia garinii + OspC rodzimych + DBPA rekombinowany

• Borrelia burgdorferi LFA-1 (antygen limfocytów Funkcja 1): białko ciało własne + Borrelia burgdorferi sensu stricto (wspólny epitopowe). Często związane z chorobami autoimmunologicznymi: kolagenozy, reumatoidalne zapalenie stawów, zapalenie naczyń (ANA CCP przeciwciałami ANCA

#borelioza #leczenieboreliozy #diagnostykaboreliozy